中华预防医学杂志    2016年03期 浙江省冬春季涉禽场所禽流感病毒污染特征及影响因素研究    PDF     文章点击量:2564    
中华预防医学杂志2016年03期
中华医学会主办。
0

文章信息

王笑笑 程伟 余昭 茅海燕 陈恩富
WangXiaoxiao,ChengWei,YuZhao,MaoHaiyan,ChenEnfu
浙江省冬春季涉禽场所禽流感病毒污染特征及影响因素研究
Avian influenza virus in various environments and risk factors for the contamination of live poultry markets during winter and spring season in Zhejiang province
中华预防医学杂志, 2016,50(3)
http://dx.doi.org/10.3760/cma.j.issn.0253-9624.2016.03.012
引用本文:

文章历史

投稿日期: 2015-08-20
上一篇:纳米SiO2暴露对人支气管上皮细胞microRNA表达水平的影响
下一篇:杭州市急性呼吸道感染婴幼儿中副流感病毒3型遗传进化及其感染特征研究
浙江省冬春季涉禽场所禽流感病毒污染特征及影响因素研究
王笑笑 程伟 余昭 茅海燕 陈恩富     
王笑笑 310051 杭州,浙江省疾病预防控制中心传染病预防控制所
程伟 310051 杭州,浙江省疾病预防控制中心传染病预防控制所
余昭 310051 杭州,浙江省疾病预防控制中心传染病预防控制所
茅海燕 310051 杭州,浙江省疾病预防控制中心传染病预防控制所
陈恩富 310051 杭州,浙江省疾病预防控制中心传染病预防控制所
摘要: 目的  分析浙江省涉禽场所外环境A型禽流感病毒污染特征及活禽市场被H7亚型污染的影响因素。方法  2014年10月至2015年3月,于浙江省11个市的涉禽场所进行标本采集,开展禽流感病毒污染状况监测。采集的标本类型包括涉禽场所的粪便标本、笼具表面擦拭标本、禽类饮水、清洗禽类的污水、宰杀或摆放禽肉案板表面擦拭标本及其他标本。本研究共采集标本6 457份,其中城乡活禽市场采集4 487份,家禽规模养殖场(户)820份、家禽散养户715份、家禽屠宰加工厂118份、野生禽鸟栖息地118份及其他场所86份。采用χ2检验比较不同类型或特征活禽市场、不同类型标本各亚型的核酸阳性率差异。采用多因素非条件二分类logistic回归模型分析活禽市场被H7亚型病毒污染的相关因素。结果  6 457份标本中,A型病毒核酸阳性率为32.54%(2 101份),其中H5亚型核酸阳性率为3.67%(237份),H7亚型为12.02%(776份),H9亚型为11.77%(760份)。237个活禽市场中,H7亚型核酸阳性的占33.8%(80个)。家禽屠宰加工厂A型流感病毒核酸阳性率较高,为43.72%(101/231)(χ2=737.80,P<0.001),城乡活禽市场H5/H7/H9亚型核酸阳性率较高,为27.55%(1 236/4 487)(χ2=436.37,P<0.001)。与售卖1种活禽的活禽市场相比,售卖≥2种活禽的市场被H7亚型感染的OR(95%CI)值为4.58(1.63~12.87)。结论  活禽市场和家禽屠宰加工厂等场所的A型禽流感病毒污染严重,售卖活禽种类较多可能是活禽市场被H7亚型污染的相关因素。
关键词 :禽流感;病毒;影响因素
Avian influenza virus in various environments and risk factors for the contamination of live poultry markets during winter and spring season in Zhejiang province
WangXiaoxiao,ChengWei,YuZhao,MaoHaiyan,ChenEnfu     
Department of Infectious Disease Control and Prevention, Zhejiang Provincial Centre for Disease Control and Prevention, Hangzhou 310051, China
Corresponding author:Chen Enfu,Email: enfchen@cdc.zj.cn
Abstract:Objective  To evaluate the prevalence of avian influenza virus in various environment and the influence factors for subtype H7 prevalence in live poultry markets.Methods  We collected environmental samples from various environments across 11 cities of Zhejiang province between October 2014 and March 2015. Cage surface swabs, chopping board surface swabs, feces, water for cleaning, drinking water and swabs of other surfaces were collected. A total of 6 457 samples were collected, including 4 487 samples from poultry markets, 820 samples from poultry farms, 715 samples from backyard poultry pens, 118 samples from poultry processing factories, 118 samples from wild bird habitats and 86 samples from other sites. The chi-squared test was used to compare virus prevalence among sample types, sites types, and poultry markets types. Binary logistic regression was used to analyze factors on H7 subtype prevalence in poultry markets.Results  Of 6 457 samples, 32.54% (2 101) samples were positive for avian influenza, with 3.67% (237) positive for H5 subtype, 12.02%(776) positive for H7 subtype, 11.77%(760) positive for H9 subtype. Of 237 live poultry markets, 33.8% (80) were positive for H7 subtype. The prevalence of influenza A in poultry processing factories was the highest at 43.72% (101/231) (χ2=737.80, P<0.001). Poultry markets were contaminated most seriously by subtype H5/H7/H9 with the prevalence of 27.55% (1 236/4 487) (χ2=436.37, P<0.001). Compared with markets with 1 type of poultry, OR was 4.58 (95%CI: 1.63-12.87) for markets with ≥2 types of poultry.Conclusion  Live poultry markets and poultry processing factories were contaminated most seriously by avian influenza. The types of poultry might be the factor which influenced the subtype H7 prevalence in poultry markets.
Key words :Influenza in birds;Viruses;Risk factors
全文

自2013年3月上海等地确诊全球首例人感染H7N9禽流感病例以来[1,2],人感染H7N9禽流感的流行已经历了3个流行季。浙江省是人感染H7N9禽流感高发的主要省份之一[3,4],全国28%的病例来自浙江。接触涉禽场所或活禽是人感染H7N9禽流感的主要危险因素[5,6],全国80%的病例有涉禽场所或活禽的暴露史,浙江病例暴露于涉禽场所或活禽的比例在85%以上。掌握涉禽场所的禽流感病毒污染特征不仅能为疫情趋势研判和风险评估提供技术数据,也是疫情防控的关键环节。为此,针对浙江省的疫情特征,在人感染H7N9禽流感高发期间,本研究对包括活禽市场在内的5类涉禽场所的禽流感病毒污染状况进行了强化监测调查,并对市场的活禽销售情况、交易区形式、清洗、消毒、休市等情况进行了重点调查,以探索浙江省活禽市场禽流感病毒污染的影响因素,从而为疫情防控提供依据。

对象与方法  

1.对象:  2014年10月至2015年3月,于浙江省11个市的涉禽场所进行标本采集,开展禽流感病毒污染状况监测。各市每月监测1次,每次采集外环境标本不少于30份。监测的涉禽场所包括城乡活禽市场、家禽规模养殖场(户)、家禽散养户集中的地区、家禽屠宰加工厂、野生禽鸟栖息地,除上述场所之外的花鸟市场、公园和马路临时市场等则归为其他场所。采集的标本类型包括涉禽场所的粪便标本、笼具表面擦拭标本、禽类饮水、清洗禽类的污水、宰杀或摆放禽肉案板表面擦拭标本,除上述标本之外的禽类体表擦拭标本、其他设备表面擦拭标本以及操作工手表面涂抹标本等则归为其他标本。本研究共采集标本6 457份,其中城乡活禽市场标本4 487份,家禽规模养殖场(户)标本820份、家禽散养户标本715份、家禽屠宰加工厂标本118份、野生禽鸟栖息地标本118份以及其他场所标本86份。

2.标本检测:  标本采集后在4 ℃条件下48 h内运送至相应的网络实验室。各网络实验室统一按照国家CDC的检测方法,采用Real-time PCR(QIAGEN公司QuantiTectTM Probe ? Kit)对标本进行核酸检测,A型流感病毒核酸阳性的标本进一步检测H5、H7和H9亚型。反应体系和结果观察均按照试剂盒说明书进行操作。

3.H7亚型影响因素调查:  采用问卷调查的形式,对2015年2—3月期间监测的所有城乡活禽市场调查可能导致市场受H7亚型病毒污染的影响因素,共计237家。调查内容包括市场活禽销售情况(包括活禽种类和数量)、市场所处位置、市场总体形式、活禽交易区形式、市场每日活禽销售时间、休市制度执行情况、清洗和消毒执行情况、活禽来源以及每日销售剩余禽只处理方式等。共调查237家活禽市场。1份以上标本检出H7阳性的活禽市场即归为阳性市场,未检出H7阳性的市场归为阴性市场。

4.统计学分析:  用EpiData 3.1软件进行数据双录入,核对无误后导入SPSS 21.0软件进行统计学分析。采用χ2检验比较不同类型或特征活禽市场、不同类型标本间不同亚型的核酸阳性率。采用多因素非条件二分类logistic回归模型分析影响活禽市场被H7亚型病毒污染的相关因素。以P<0.05为差异有统计学意义。

结果  

1.基本情况:  从5类涉禽场所采集的6 457份标本中,共检出A型流感病毒核酸阳性标本2 101份(32.54%),其中H5亚型核酸阳性237份(3.67%),H7亚型核酸阳性776份(12.02%),H9亚型核酸阳性760份(11.77%)。237家活禽市场中,H7亚型核酸阳性80家。

2.不同类型涉禽场所的禽流感病毒污染特征:  家禽屠宰加工厂的A型流感病毒核酸阳性率较高,为43.72%,野生候鸟栖息地较低,为0.85%,差异有统计学意义。城乡活禽市场的H5/H7/H9亚型核酸阳性率较高,为27.55%,野生候鸟栖息地较低,为0.85%,差异有统计学意义。不同类型场所污染的病毒亚型有差异,城乡活禽市场和家庭散养户以H7亚型和H9亚型为主,家禽规模养殖场(户)和家禽屠宰加工厂则以H9亚型为主,野生候鸟栖息地只检出了H7亚型。详见表1

表1不同类型涉禽场所禽流感病毒各亚型检出情况比较[n(%)]

3.不同类型标本的禽流感病毒污染特征:  禽肉案板表面擦拭标本的A型流感病毒核酸阳性率较高,为47.83%,粪便标本的核酸阳性率较低,为24.87%,差异有统计学意义。清洗禽类的污水的H5/H7/H9亚型核酸阳性率较高,为30.77%,粪便标本较低,为16.08%,差异有统计学意义。不同类型标本检出的病毒亚型有差异,粪便标本、笼具表面擦拭标本、清洗禽类的污水、禽肉案板表面擦拭标本以H7和H9亚型为主,禽类饮水则以H9亚型为主。详见表2

表2不同类型标本禽流感病毒各亚型核酸检出情况比较[n(%)]

4.不同特征活禽市场H7亚型核酸阳性情况:  售卖>1种活禽的市场阳性率高于售卖1种活禽的市场(P=0.005);活禽数量30只以上的市场与30只以下的市场相比差异无统计学意义;每日交易时间>7 h的市场H7亚型核酸阳性率高于≤7 h的市场(P=0.036);连续销售禽类>6 d的市场H7亚型核酸阳性率高于≤6 d的市场(P=0.023);执行休市制度或清洗消毒制度的市场阳性率均低于不执行的市场(P值分别为0.014、0.023)。详见表3

表3不同特征活禽市场A型禽流感病毒H7亚型核酸阳性率比较(n=237)

5.影响活禽市场被H7亚型病毒污染的多因素分析:  多因素logistic回归分析显示,活禽种类多寡是场所阳性与否的影响因素(OR=4.58,95% CI:1.63~12.87)。每日交易时间、连续销售禽类天数、执行市场休市制度、执行市场清洗消毒制度等因素对市场H7亚型的核酸阳性率无相关性。详见表4

表4影响活禽市场被H7亚型禽流感病毒污染的多因素logistic回归分析

讨论  禽流感是由甲型流感病毒引起的一种禽类急性传染病。2013年,中国报告了一种新型重组人禽流感——H7N9,引起全球关注。目前研究认为,涉禽场所与人禽流感的发生关系密切。禽流感病毒能在涉禽场所的相关外环境中,如粪便、水中存活数月之久[7]。外环境禽流感病毒的监测,能为疾病的流行提供预测预警,同时也是评价防控措施效果的重要依据。本研究探讨了浙江省涉禽场所外环境中的禽流感病毒污染特征,以及导致活禽市场H7亚型污染的可能影响因素,以期为监测策略的优化和疾病的防控提供依据。
        调查显示,不同场所、标本类型,禽流感病毒污染特征各有特点。总体来说,H7和H9亚型以城乡活禽市场的污染较为严重,而A型流感、H5亚型则以家禽屠宰加工厂较为严重。显然,城乡活禽市场和屠宰加工厂禽类之间的接触、混杂、流动相对更为频繁,禽流感病毒在此类场所也更容易产生累积、放大效应,这应该是这两类场所污染较为严重的原因之一。同样,不同标本类型中,禽肉案板、清洗禽类的污水这类共用的工具或容易蓄积病毒的标本,病毒的核酸阳性率也更高。提示在禽流感的防控中,城乡活禽市场仍应是重点关注的场所,而且在对涉禽场所进行清洗消毒时,禽肉案板、清洗禽类的污水应是重点清洗、消毒的对象。国外的研究也发现禽肉案板等共用的工具[8,9,10],H5N1病毒的核酸检出率较高,而在粪便标本的检出率则较低,这与本调查的结果一致。但本研究中,禽类饮水的H5亚型核酸阳性率则远低于印度尼西亚的研究结果(分别为2.33%和11.9%)[6],而H9亚型则远高于中国香港等地的研究结果[11]
        现有研究认为,野禽在禽流感病毒的储存、传播中扮演着重要角色,H7N9病毒的溯源分析显示,NA片段可能来自于亚欧大陆迁徙的野鸟[12]。东洞庭湖地区野禽驯养基地监测到的亚型有H10、H4和H5等[13],鄱阳湖的某研究显示,H4、H3、H6、H10、H5和H1等亚型占91%[14]。本研究中,野生候鸟栖息地监测到的亚型则主要为H7。活禽种类多、每日交易时间长和连续销售禽类天数多是活禽市场H7亚型阳性的影响因素,而执行休市制度和清洗、消毒制度则是保护因素。刘慧等[15]的研究也显示了同时售卖多种禽类是禽流感病毒污染的影响因素,此外还证实禽类存栏过夜也是影响因素,但在本研究中则并未显示该因素对阳性率有影响。尽管有研究表明复市后的第7天活禽市场的污染水平即恢复到休市前,但在暂未能全面推行"冷鲜禽"的地区,实行定期休市、定期清洗消毒和缩短每日交易时间等综合措施,仍不失为一种减少活禽市场污染,降低发病风险的权宜措施[16]

参考文献
[1]LiQ, ZhouL, ZhouM, et al. Epidemiology of human infections with avian influenza A(H7N9) virus in China[J]. N Engl J Med, 2014, 370(6):520-532. DOI: 10.1056/NEJMoa1304617.
[2]褚维,宋黎黎,劳宝法,等.H7N9禽流感监测病例的病原谱分析[J].中华预防医学杂志,2013,47(12):1153-1154.DOI:10.3760/cma.j.issn.0253-9624.2013.12.018.
[3]ChenE, WangF, LvH, et al. The first avian influenza A (H7N9) viral infection in humans in Zhejiang Province, China: a death report[J]. Front Med, 2013, 7(3):333-344. DOI: 10.1007/s11684-013-0275-1.
[4]丁华,谢立,考庆君,等.杭州市首例人感染H7N9禽流感病例调查[J].中华预防医学杂志,2013,12(47):1155-1156.DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-9624.2013.12.019.
[5]YuH, WuJT, CowlingBJ, et al. Effect of closure of live poultry markets on poultry-to-person transmission of avian influenza A H7N9 virus: an ecological study[J]. Lancet, 2014, 383(9916):541-548. DOI: 10.1016/S0140-6736(13)61904-2.
[6]Pantin-JackwoodMJ, MillerPJ, SpackmanE, et al. Role of poultry in the spread of novel H7N9 influenza virus in China[J]. J Virol, 2014, 88(10):5381-5390. DOI: 10.1128/JVI.03689-13.
[7]KhalenkovA, LaverWG, WebsterRG. Detection and isolation of H5N1 influenza virus from large volumes of natural water[J]. J Virol Methods, 2008, 149(1):180-183. DOI: 10.1016/j.jviromet.2008.01.001.
[8]SamaanG, GultomA, IndrianiR, et al. Critical control points for avian influenza A H5N1 in live bird markets in low resource settings[J]. Prev Vet Med, 2011, 100(1):71-78. DOI: 10.1016/j.prevetmed.2011.03.003.
[9]IndrianiR, SamaanG, GultomA, et al. Environmental sampling for avian influenza virus A (H5N1) in live-bird markets, Indonesia[J]. Emerg Infect Dis, 2010, 16(12):1889-1895. DOI: 10.3201/eid1612.100402.
[10]HormSV, SornS, AllalL, et al. Influenza A(H5N1) virus surveillance at live poultry markets, Cambodia, 2011[J]. Emerg Infect Dis, 2013, 19(2):305-308. DOI: 10.3201/eid1902.121201.
[11]LeungYH, ZhangLj, ChowCK, et al. Poultry drinking water used for avian influenza surveillance[J]. Emerg Infect Dis, 2007, 13(9):1380-1382.DOI: 10.3201/eid1309.070517.
[12]田怀玉.气候变化是否会改变野鸟H5N1禽流感暴发风险[J].中华预防医学杂志,2014,12(48):1067.
[13]史景红,高立冬,张红,等.东洞庭湖地区野禽驯养繁殖基地的禽流感病毒调查[J],动物学杂志,2015,5(4):607-614.DOI: 10.13859/j.cjz.201504013.
[14]DuanL, ZhuH, WangJ, et al. Influenza virus surveillance in migratory ducks and sentinel ducks at Poyang Lake, China[J]. Influenza Other Respi Viruses, 2011, 5Suppl 1:65-68.
[15]刘慧,陈宗道,肖新才,等.广州地区活禽市场休市措施对控制禽流感病毒污染效果的评价[J].中华流行病学杂志,2014,35(7):832-837.DOI:10.3760/cma.j.issn.0254-6450.2014.07.017.
[16]YuanJ, TangX, YangZ, et al. Enhanced disinfection and regular closure of wet markets reduced the risk of avian influenza A virus transmission[J]. Clin Infect Dis, 2014, 58(7):1037-1038. DOI: 10.1093/cid/cit951.