中华预防医学杂志    2020年08期 成人接种重组(汉逊酵母)乙型肝炎疫苗(CpG ODN佐剂)的安全性及免疫原性:Ⅰ期临床试验初步结果    PDF     文章点击量:320    
中华预防医学杂志2020年08期
中华医学会主办。
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梁贞贞 邵彦 王慎玉 严传富 陈波 张筠 陈颖萍 胡晓松 吕华坤
LiangZhenzhen,ShaoYan,WangShenyu,YanChuanfu,ChenBo,ZhangJun,ChenYingping,HuXiaosong,LyuHuakun
成人接种重组(汉逊酵母)乙型肝炎疫苗(CpG ODN佐剂)的安全性及免疫原性:Ⅰ期临床试验初步结果
Safety and immunogenicity analysis of recombinant (hansenula polymorpha) hepatitis B vaccine (CpG ODN adjuvant) among adults: the preliminary results of phase I clinical trial
中华预防医学杂志, 2020,54(8)
http://dx.doi.org/10.3760/cma.j.cn112150-20200401-00490
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投稿日期: 2020-04-01
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成人接种重组(汉逊酵母)乙型肝炎疫苗(CpG ODN佐剂)的安全性及免疫原性:Ⅰ期临床试验初步结果
梁贞贞 邵彦 王慎玉 严传富 陈波 张筠 陈颖萍 胡晓松 吕华坤     
梁贞贞 浙江省疾病预防控制中心免疫规划所,杭州 310051
邵彦 长春华普生物技术有限公司 130103
王慎玉 浙江省疾病预防控制中心免疫规划所,杭州 310051
严传富 浙江省开化县疾病预防控制中心,衢州 324300
陈波 浙江省开化县疾病预防控制中心,衢州 324300
张筠 长春华普生物技术有限公司 130103
陈颖萍 浙江省疾病预防控制中心免疫规划所,杭州 310051
胡晓松 浙江省疾病预防控制中心免疫规划所,杭州 310051
吕华坤 浙江省疾病预防控制中心免疫规划所,杭州 310051
摘要: 目的  评价重组(汉逊酵母)乙型肝炎疫苗(CpG ODN佐剂)的安全性,并探索CpG ODN佐剂对乙型肝炎疫苗免疫效果的影响。方法  选择浙江省衢州市开化县为研究现场,于2016年10月26日启动志愿者招募,最终选取48名18~60岁乙型肝炎病毒(HBV)筛查指标阴性、肝肾功能筛选判定正常且符合纳入和排除标准的志愿者为研究对象,采用随机、盲法、对照的设计方法将研究对象按1∶1分为试验组和对照组,每组24名。按0-1-6程序接种疫苗,试验组接种含CpG ODN 250 μg的重组(汉逊酵母)乙型肝炎疫苗,对照组接种市售(大连汉信)乙型肝炎疫苗,分时段观察并记录其接种后情况,比较两组间各类不良反应发生率的差异,收集免疫前后血清,比较两组乙型肝炎表面抗体(抗HBs)阳性率和几何平均浓度(GMC)的差异。结果  观察期间,试验组不良事件发生率为66.67%(16例),对照组为54.17%(13例)(P=0.556)。不良事件均为1级或者2级,未出现3级及以上不良反应。全程免疫后抗体GMC结果显示,全分析数据集(FAS集)试验组抗体GMC为2 598.56(95%CI:1 127.90~5 986.90) mIU/ml,高于对照组371.97(164.54~840.91)mIU/ml;方案数据集(PPS集)试验组抗体GMC为7 808.21(3 377.00~18 052.00)mIU/ml,高于对照组[843.22(95%CI:213.80~3 325.90)mIU/ml]。FAS(PPS)集抗HBs阳性率结果显示,试验组和对照组均为95.83%(100.00%);FAS(PPS)集抗HBs强阳性率结果显示,试验组为79.17%(90.00%),对照组为33.33%(50.00%),FAS集组间差异有统计学意义(P=0.003),PPS集组间差异无统计学意义(P=0.074)。结论  与对照疫苗相比,CpG乙型肝炎疫苗有较好的安全性,且显示出更好的免疫原性。
关键词 :肝炎,乙型;疫苗;CpG ODN佐剂;安全性;免疫效果
Safety and immunogenicity analysis of recombinant (hansenula polymorpha) hepatitis B vaccine (CpG ODN adjuvant) among adults: the preliminary results of phase I clinical trial
LiangZhenzhen,ShaoYan,WangShenyu,YanChuanfu,ChenBo,ZhangJun,ChenYingping,HuXiaosong,LyuHuakun     
Institute for Immunization and Prevention, Zhejiang Provincial Center of Disease Control and Prevention, Hangzhou 310051, China
Corresponding author: Lyu Huakun, Email: hklv@cdc.zj.cn
Abstract:Objective  To evaluate the safety and immune effect of recombinant hepatitis B vaccine (CpG ODN adjuvant).Methods  On Oct. 26, 2016, we launched volunteer recruitment in Kaihua county, Quzhou city, Zhejiang Province. In the randomized, double-blind, controlled trial, a total of 48 subjects with negative HBV screening tests and normal hepatorenal function among 18 and 60 years old were selected and divided into two groups randomly, 24 cases each. The experimental group was given 250 μg of CpG ODN recombinant (Hansenula polymorpha) Hepatitis B vaccine and the control group was given 10 μg of commercial Hepatitis B vaccine with timed at 0, 1and 6 months. The inoculation reactions were compared the difference between the two groups after observed and recorded in time periods. We also collected serum before and after immunization to compare the two groups of anti-HBs positive rate, geometric mean concentration(GMC).Results  During the study period, the incidence of adverse events was 66.67%(16/24) in the experimental group and 54.17%(13/24) in the control group, with no significant difference(P=0.556). The severities of adverse events were level 1 or level 2, and no level 3 or above adverse reactions occurred. After full-course immunization, in the FAS data set, the anti-HBs GMC in the experimental group [2 598.56(1 127.90-5 986.90) mIU/ml] was higher than that in the control group[371.97(164.54-840.91) mIU/ml] In the PPS set, the GMC of test group was 7 808.21(3 377.00-18 052.00) mIU/ml, which was higher than that of the control group [843.22(213.80-3 325.90) mIU/ml]. The anti-HBs positive rate of FAS(PPS) was 95.83%(100.00%) in the experimental group and the control group; The anti-HBs strongly positive rate of FAS(PPS) was 79.17%(90.00%) in the experimental group and 33.33%(50.00%) in the control group, with statistically significant differences among the FAS set(P=0.003) and no statistically significance differences among the PPS set(P=0.074).Conclusion  CpG Hepatitis B Vaccine is safe and shows better immunogenicity than the control vaccine.
Key words :Hepatitis B;Vaccines;CpG ODN adjuvant;Safety;Immune efficacy
全文

乙型肝炎是由乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)引起的可威胁生命的肝脏感染性疾病。接种乙型肝炎疫苗是预防乙型肝炎的主要措施。成人接种现有乙型肝炎疫苗,可能存在低(无)应答[乙型肝炎表面抗体(hepatitis B surface antibody,抗HBs)水平<100 mIU/ml]、全程接种率低等问题1, 2,改进措施包括疫苗复种、增加接种剂量和降低剂次等,但疫苗复种和加大剂量会增加安全风险和成本,缩短剂次易降低免疫应答效果,因此开发一种不增加抗原含量且能有效增强免疫效果的新佐剂乙型肝炎疫苗十分必要3, 4, 5, 6, 7
        CPG ODN(CpG-oligodeoxynucleotide)是以非甲基化的CpG二级核苷酸为核心,具有免疫刺激作用的核苷酸序列,能激活Toll-like受体9,诱导多种免疫细胞的活化、增殖、分化,促进多种细胞因子产生,提高细胞免疫8, 9, 10, 11。1997年Weiner等12首次证实了CpG ODN作为佐剂高效、低毒的特点。此后国内外学者对CPG作为感染性疾病和肿瘤疫苗佐剂进行了大量的研究,其中部分CpG乙型肝炎疫苗已进入临床试验阶段。2018年,Dynavax公司生产的Heplisav-B(CPG ODN 1018)乙型肝炎疫苗在美国批准上市,免疫程序为2剂次,0~1月完成,研究显示其可显著增强免疫应答13, 14, 15, 16。本研究以人工合成的寡核苷酸序列CpG ODN作为乙型肝炎疫苗的佐剂17,以10 μg市售乙型肝炎疫苗作为对照,评价成人接种乙型肝炎疫苗(CpG ODN佐剂)(简称CpG乙型肝炎疫苗)的安全性和免疫原性,为新型佐剂乙型肝炎疫苗的开发提供依据。

对象与方法  1.对象:选择浙江省衢州市开化县为研究现场,于2016年10月26日启动志愿者招募,共招募志愿者226名,经知情同意后,在当地二级及以上医院进行乙型肝炎感染指标筛查。研究对象的入选标准为:18~60岁,HBV筛查指标[乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)、抗HBs、乙型肝炎核心抗体(hepatitis B core antibody,抗HBc)]阴性,肝肾功能判定正常或异常无临床意义,体温≤37.0 ℃,自愿参加;排除标准为严重过敏史、神经系统疾病史或精神病史、血小板减少症或其他凝血功能障碍病史,免疫功能缺陷,严重慢性疾病和皮肤病,妊娠或7个月内有怀孕计划,近3个月注射过人血丙种免疫球蛋白和研究者认为其他有可能影响试验评估的任何情况。最终共计纳入48名研究对象。采用随机、盲法、对照的方法将研究对象按1∶1分为试验组和对照组,每组24名。本研究经国家药品监督管理局批准(批号:2013L01405),并获得浙江省疾病预防控制中心伦理委员会批准(批号:2016-001-01),研究对象均已签署知情同意书。
        2.研究疫苗与接种程序:试验组接种疫苗为云南沃森生物技术股份有限公司生产的重组(汉逊酵母)乙型肝炎疫苗(CpG ODN佐剂),疫苗规格:0.5 ml/瓶,含乙型肝炎病毒表面抗原10 μg,CpG ODN 250 μg,铝含量为0.45~0.60 mg/ml(批号:20151201);对照组接种疫苗为大连汉信生物制药有限公司生产的重组(汉逊酵母)乙型肝炎疫苗,疫苗规格:0.5 ml/瓶,含乙型肝炎病毒表面抗原10 μg,铝含量为0.35~0.62 mg/ml(批号:201505082)。各组均按照0-1-6月的免疫程序进行疫苗接种,每次接种1剂,每剂0.5 ml。接种部位均为上臂外侧三角肌附着处皮肤,接种途径为肌肉注射。
        3.随机与盲法:由北京康特瑞科统计科技有限公司应用SAS 9.3按照试验组和对照组1∶1 的比例产生随机编码对疫苗进行设盲,通过疫苗的编盲实现对受试者的随机。由申办方不参加临床试验的人员在疫苗保存温度条件下按随机化的结果对试验疫苗和对照疫苗进行贴标和包装,保证对照苗与试验苗外观相同,进行双盲。
        4.安全性观察:安全性评价内容包括局部不良反应和全身不良反应,如果某个研究对象发生≥1次同一不良反应,则取严重程度最重的一次。受试者每剂疫苗接种后30 min,0~7 d每天测量体温和观察不良事件并记录到日记卡,第8天交回日记卡,8~30 d所有不良事件记录到联系卡上。不良事件分级标准参考《预防用疫苗临床试验不良反应分级标准指导原则》(国食药监注[2005]493号)。
        5.免疫原性观察:采集所有受试者首剂免前及第2、3剂接种后30 d血样,用于免疫原性评价。血样委托中国食品药品检定研究院采用化学发光免疫分析法进行血清乙型肝炎表面抗体(抗HBs)检测,其中首剂免前血样复核HBsAg和抗HBc,每剂次免后血样均检测抗HBs 浓度,以抗体浓度≥10.0 mIU/ml为抗体阳性,≥1 000.0 mIU/ml定义为抗体强阳性。
        6.质量控制:项目开始前,所有研究者均接受了CpG乙型肝炎疫苗Ⅰ期临床试验方案、《药物临床试验质量管理规范》和岗位培训,具有相关岗位资质并考核合格,指定专人对项目资料进行管理。制定《质量管理实施手册》,对开化县试验现场的组织实施进行全面的质量管理,保证临床试验的真实性,完整性,规范性。研究过程中任何记录不得随意更改,确因填写错误需要更正必须保证原记录清晰可辨,并由更正者签名署日。
        7.统计学分析:采用Excel 2010软件建立数据库,数据核对无误后导入SAS 9.3软件进行统计学分析。(1)基本情况分析:年龄符合正态分布,采用进行描述,采用成组t检验比较两组间差异;采用Fisher确切概率法比较两组间性别构成差异。(2)安全性分析:所有接种过1剂的受试者均进入安全性分析集。分析受试者疫苗接种后总不良事件、局部反应和全身反应等不良事件发生率。采用Fisher确切概率检验比较两组间不同时间不良反应发生率的差异,采用Wilcoxon秩和检验对两组间不良事件严重程度进行比较。(3)免疫原性分析:所有接种过1剂的受试者均进入全分析数据集(full annalysis set,FAS),对肝功能和血常规正常以及HBV筛查指标阴性者进入符合方案集(per protocol set,PPS)。免疫原性FAS和PPS数据集主要用于疫苗的免疫原性评价。计算两组抗体阳转率,采用Fisher确切概率法比较两组间差异;计算两组抗体几何平均浓度(geometric mean concentration,GMC)及95%CI值,经对数转换后采用t检验比较两组的差异;采用Cochran-Mantel-Haenszel(CMH)检验比较免疫后两组间抗体水平构成的差异。双侧检验,检验水准α=0.05。

结果  1.基本情况:共入组48名受试者,年龄为(41.44±9.14)岁,其中试验组为(41.92±9.85)岁,对照组为(40.96±8.56)岁,差异无统计学意义(t=0.36,P=0.721)。试验组男性7名(29.17%),女性17名(70.83%),对照组男性10名(41.67%),女性14名(68.33%),两组间男女性别构成差异无统计学意义(P=0.547)。全部入组受试者均进入安全性数据集,接种过程中因受试者自愿退出和发生严重不良反应,脱落2例(试验组1例,对照组1例),完成3剂全程接种率为95.8%(46例);入组受试者全部进入FAS,进入PPS的受试者有22例(试验组10例,对照组12例),占全部受试者的45.83%,详细试验流程见图1

图1CpG佐剂乙型肝炎疫苗临床试验流程图
2.安全性观察结果:试验组不良事件发生率为66.67%(16例),对照组发生率为54.17%(13例),差异无统计学意义(P=0.556)。其中不良反应多数发生在0~3 d内,详见表1。不良事件严重程度均为1级或者2级,未出现3级及以上不良反应。观察期间,试验组和对照组各有2例(8.33%)严重不良事件发生,经判定与研究疫苗接种均无关。与疫苗有关的不良事件中,试验组和对照组发生率均为45.83%(11例),组间发生率差异无统计学意义(P=1.000)。局部不良反应中,试验组主要症状发生率从高到低分别为:疼痛(9例,37.50%)、发红(2例,8.33%)、肿胀(2例,8.33%);对照组依次为:疼痛(3例,12.50%)、硬结(3例,12.50%)、发红(3例,8.33%)、瘙痒(2例,8.33%)、肿胀(1例,4.17%)。其中试验组疼痛1级的发生率(9例,37.50%)高于对照组发生率(2例,12.50%),差异有统计学意义(P=0.049)。除疼痛外,两组间发红、肿胀、硬结和瘙痒发生率的差异无统计学意义(P>0.05)。详见表2。全身不良反应中,试验组主要症状依次为:发热(2例,8.33%)、咳嗽(2例,8.33%)、疲劳乏力(1例,4.17%)、恶心呕吐(1例,4.17%);对照组依次为:发热(5例,20.83%)、咳嗽(2例,4.17%)。两组间不同严重程度不良反应发生率的差异均无统计学意义(P>0.05)。
表1试验组和对照组接种乙型肝炎疫苗后不同时间内不良事件发生情况
表2试验组和对照组接种乙型肝炎疫苗后发生的征集性不良事件严重程度比较[%(例)]
3.全程免疫后抗HBs GMC:FAS数据集中,试验组为2 598.56(95%CI:1 127.90~5 986.90)mIU/ml高于对照组371.97(95%CI:164.54~840.91)mIU/ml,差异有统计学意义(t=3.45,P=0.001);PPS集中,试验组为7 808.21(95%CI:3 377.00~18 052.00)mIU/ml,高于对照组[843.22(95%CI:213.80~3 325.90)mIU/ml],差异有统计学意义(t=2.91,P=0.009)。在FAS和PPS集中,第2剂免疫后30 d抗体GMC试验组分别高于对照组,差异有统计学意义(FAS:t=3.39,P=0.002;PPS:t=2.93,P=0.008),见表3
表3试验组和对照组接种乙型肝炎疫苗后抗体阳转率和GMC比较
4.全程免疫后抗HBs阳性率:FAS集(PPS集)中,试验组抗HBs阳性率为95.83%(100.00%),对照组为95.83%(100.00%),差异无统计学意义(FAS:P=1.000;PPS:P=1.000);抗HBs强阳性率,试验组为79.17%(90%),对照组为33.33%(50%),FAS数据集组间差异有统计学意义(P=0.003),PPS数据集组间差异无统计学意义(P=0.074)。
        5.免疫后抗体水平分布情况:第2剂免疫后抗体水平分布试验组高于对照组,组间差异有统计学意义(FAS:χ2=8.63,P=0.003;PPS:χ2=6.37,P=0.012),全程免疫后抗体水平分布试验组高于对照组(FAS:χ2=10.60,P=0.001;PPS:χ2=5.68,P=0.017),图2可以直观的看出试验组和对照组免疫前后抗体水平。
图2试验组和对照组接种乙型肝炎疫苗前后抗体滴度逆向累积分布图
本研究结果显示,在观察期内,试验组总体不良事件发生率未高于对照组,不良事件以3 d内较为常见,持续时间较短,严重程度均为1级、2级,无3级及以上不良反应。与Halperin等18的研究结果相类似,试验疫苗(含CpG佐剂)和对照疫苗两组不良事件发生率低且反应谱相似,多为接种部位疼痛、发热、发红等一般不良反应,且症状大多较为轻微,头痛是两组中最常见的全身不良反应,且试验组轻度注射部位压痛较对照组更为常见,这可能是由于添加了CpG佐剂所致。
        本研究筛选期HBV的筛查指标为全阴,接种前再次采血并复核HBV筛查指标仍有部分阳性,可能因第1次血检由当地医院采用的酶联免疫吸附法进行,第2次复核血检及免后抗体检测部分均由中国食品药品检定研究院采用化学发光免疫方法进行检测,因检测方法不同所致19。免疫原性结果显示,试验组和对照组完成全程免疫后血清阳性率均为95%以上,免疫效果良好,与国内乙型肝炎疫苗阳性率报道基本一致5, 10, 11, 18。其中CpG乙型肝炎疫苗组第2剂免后即可达到95%的阳性率,这提示我们接种CpG乙型肝炎疫苗可加快免后乙型肝炎抗体产生,2剂次可达到对照疫苗3剂次效果。该结果与Dynavax公司生产的CpG乙型肝炎疫苗的临床研究结果一致13。快速诱导产生保护性抗体具有许多优点,特别是在需要快速保护或后续剂次无法保证的情况下,同时就疫苗成本和人力而言,两剂疫苗计划的实施成本将低于三剂疫苗20
        一项评估国内市场上六种乙型肝炎疫苗免疫原性的研究显示,在对16~50岁乙型肝炎病毒血清学标志物呈阴性的人群按0-1-6全程免疫后,10 μg 剂量组中免疫效果最好的是大连汉信生产的疫苗(抗体阳性率为96.9%,抗体滴度为906.07 mIU/ml),这与本研究对照组在HBV筛查指标阴性人群中的免疫原性结果基本一致,20 μg剂量组中免疫效果最好的是葛兰素史克生产的疫苗(抗体阳性率为100.0%,抗体滴度为1 335.45 mIU/ml)21。从抗体水平上看,本研究试验组完成全程免后抗体水平高于对照组,也高于国内其他乙型肝炎疫苗的免疫原性研究结果21, 22, 23, 24
        综上所述,通过本临床研究的初步分析可以认为,与对照组(大连汉信)乙型肝炎疫苗相比,添加CpG ODN佐剂不增加乙型肝炎疫苗安全风险,能快速诱导机体产生水平相当的保护性抗体,显示出更好的免疫原性。
        本次研究的局限性:Ⅰ期临床研究,样本量少,观察对象以40岁左右为主,故未做分年龄组分析。研究随访时间较短,一些发生频度低的不良事件,很难在此期间被发现,在人群中的免疫持久性还有待观察。研究纳入人群为乙型肝炎筛查阴性的人群,在其他人群中的安全性和免疫原性也需要进一步验证。按照疫苗临床试验的规范要求,下一步应增加样本量,继续做好Ⅱ/Ⅲ期临床试验,以获得更加科学的数据。

参考文献
1KeH, XiaopingS, HuizhenZ, et al. Revaccination of non-and low-responders after a standard three dose hepatitis B vaccine schedule[J]. Hum Vaccines, 2012, 08(12): 1845-1849.DOI:10.4161/hv.21818.
2林云,曹家穗,何奔,等. 成人乙肝疫苗全程接种影响因素及免疫效果调查[J]. 中国农村卫生事业管理, 2013, 33(06): 648-650.
3GhebrehewetS, BaxterD, FalconerM, et al. Intradermal recombinant hepatitis B vaccination(IDRV) for non-responsive healthcare workers(HCWs)[J]. Hum Vaccines, 2008, 04(04): 280-285.DOI:10.4161/hv.4.4.5687.
4张丽, 颜丙玉, 吕静静, 等. 成人乙型肝炎疫苗接种后12年免疫记忆持久性及相关因素分析[J]. 中华预防医学杂志, 2019, 53(05):497-502.
5刘绍芬. 成人接种乙肝疫苗后免疫情况的观察与分析[J]. 医学信息, 2014, 06(38): 373-374.
6赵芮, 刘倩, 庄贵华. 中国大学新生现阶段乙型肝炎血清学五项指标检测结果Meta分析[J]. 中华预防医学杂志, 2018(08):849-854. DOI:10.3760/cma.j.issm.0253-9624.2018.08.014.
7林洪华. 不同剂量重组酵母乙型肝炎疫苗成人免疫效果的对照研究[J]. 饮食保健, 2016, 03(03): 25-26.
8向晓星, 周霞秋, 王俊学, 等. CpG-ODN联合HBsAg体外对慢性乙肝患者外周血树突状细胞STAT、SOCS通路的影响[J]. 中华微生物学和免疫学杂志, 2005, 25(11): 919-922.
9陈军浩, 吴超, 欧阳建, 等. CpG寡核苷酸对人外周血B淋巴细胞免疫刺激作用[J]. 现代检验医学杂志, 2006, 21(04): 1-3.
10MengY, CarpentierAF, ChenL, et al. Successful combination of local CpG-ODN and radiotherapy in malignant glioma[J]. Int J Cancer, 2005, 116(06): 992-997.DOI:10.1002/ijc.21131.
11SagaraI, EllisRD, DickoA, et al. A randomized and controlled Phase 1 study of the safety and immunogenicity of the AMA1-C1/Alhydrogel+CPG 7909 vaccine for Plasmodium falciparum malaria in semi-immune Malian adults[J]. Vaccine, 2009, 27(52): 7292-7298.DOI:10.1016/j.vaccine.2009.10.087.
12WeinerGJ, LiuHM, WooldridgeJE, et al. Immunostimulatory oligodeoxynucleotides containing the CpG motif are effective as immune adjuvants in tumor antigen immunization[J]. P Natl AcadSci USA, 1997, 94(20): 10833-10837.
13HyerR, McguireDK, XingB, et al. Safety of a two-dose investigational hepatitis B vaccine, HBsAg-1018, using a toll-like receptor 9 agonist adjuvant in adults[J]. Vaccine, 2018, 36(19): 2604-2611.DOI:10.1016/j.vaccine.2018.03.067.
14CooperCL, DavisHL, AngelJB, et al. CPG 7909 adjuvant improves hepatitis B virus vaccine seroprotection in antiretroviral-treated HIV-infected adults[J]. Aids, 2005, 19(14): 1473-1479.DOI: 10.1097/01.aids.0000183514.37513.d2.
15SiegristCA, PihlgrenM, TougneC, et al. Co-administration of CpG oligonucleotides enhances the late affinity maturation process of human anti-hepatitis B vaccine response[J]. Vaccine, 2005, 23(05): 615-622.DOI:10.1016/j.vaccine.2004.07.014.
16HeywardWL, MichaelK, JosephB, et al. Immunogenicity and safety of an investigational hepatitis B vaccine with a Toll-like receptor 9 agonist adjuvant(HBsAg-1018) compared to a licensed hepatitis B vaccine in healthy adults 40-70 years of age[J]. Vaccine, 2013, 31(46): 5300-5305.DOI:10.1016/j.vaccine.2013.05.068.
17钱雯, 王丽丽, 马波, 等. CpG ODN佐剂对乙肝疫苗抗原免疫原性的影响[J]. 免疫学杂志, 2014(10): 878-881.
18HalperinSA, DobsonS, McneilS, et al. Comparison of the safety and immunogenicity of hepatitis B virus surface antigen co-administered with an immunostimulatory phosphorothioate oligonucleotide and a licensed hepatitis B vaccine in healthy young adults[J]. Vaccine, 2006, 24(01): 20-26.DOI:10.1016/j.vaccine.2005.08.095.
19魏桂芬, 丘文慧, 张宇平. 乙型肝炎血清标志物四种检测方法的对比分析[J]. 海南医学院学报, 2012, 18(04): 498-500.
20AdamsM, BolshounD, BruceT, et al. Immunogenicity of a two-dose investigational hepatitis B vaccine, HBsAg-1018, using a toll-like receptor 9 agonist adjuvant compared with a licensed hepatitis B vaccine in adults[J]. Vaccine, 2017, 36(05): 668-674.DOI:10.1016/j.vaccine.2018.03.067.
21YangL, YaoJ, LiJ, et al. Suitable hepatitis B vaccine for adult immunization in China[J]. Immunol Res, 2016, 64(01): 242-250.DOI:10.1007/s12026-015-8742-1.
22宋雪芳, 曾滢, 方鑫, 等. 20 μg重组乙型肝炎疫苗(酿酒酵母)安全性和免疫原性的随机双盲对照研究[J]. 中国病毒病杂志, 2013(05): 353-357.
23HalperinSA, WardB, CooperC, et al. Comparison of safety and immunogenicity of two doses of investigational hepatitis B virus surface antigen co-administered with an immunostimulatory phosphorothioate oligodeoxyribonucleotide and three doses of a licensed hepatitis B vaccine in healthy adult[J]. Vaccine, 2012, 30(15): 2556-2563.DOI:10.1016/j.vaccine.2012.01.087.
24WuZ, BaoH, YaoJ, et al. Suitable hepatitis B vaccine for adult immunization in China: a systematic review and meta-analysis[J]. Hum Vacc Immunother, 2018, 01: 220-227.DOI:10.1080/21645515.2018.1509172.